Токсоплазмоз - это системное заболевание, вызываемое простейшими Toxoplasma gondii. Этот паразит широко распространен и способен инфицировать многие виды млекопитающих, особенно часто встречается в тропиках и реже в холодных, безводных местностях. Серологические исследования в человеческой популяции показывают частоту инфицирования токсоплазмой в диапазоне от менее 1% молодых взрослых в одних районах, до 90% пожилых людей - в других. Основные пути передачи инфекции человеку - врожденный и оральный, при употреблении загрязненной пищи, контакте с домашними животными, особенно кошками [43-46]. Менее часто встречается, но имеет большую клиническую важность передача инфекции от человека к человеку через зараженные продукты переработки крови и трансплантаты тканей [47].

Одной из ситуаций, при которых токсоплазмоз представляет серьезную опасность, является первичное заражение во время беременности [48-51]. Риск тяжелых последствий для плода тем выше, чем на более раннем сроке беременности произошло заражение женщины токсоплазмозом, но, в этот же период ниже вероятность заражения плода. И, наоборот на более поздних сроках беременности, процент передачи токсоплазмоза плоду очень высок, но риск тяжелых поражений плода снижается. Потенциальная опасность инфицирования плода токсоплазмой составляет 6% - в начале первого триместра беременности, 40% - в конце первого и в течение второго триместра беременности и достигает 72% - в третьем [52-54]. Если женщина переболела токсоплазмозом до беременности (не менее чем за полгода до нее), ее будущему ребенку токсоплазмоз не угрожает.

Наиболее общие клинические проявления болезни - сама собой проходящая фебрильная лимфопатия, протекающая у здоровых взрослых субклинически или со слабыми клиническими проявлениями. Тем не менее, инфицирование пациента с подавленной иммунной системой или развивающегося плода может привести к весьма серьезным последствиям. Оппортунистические инфекции токсоплазмоза или реактивация субклинической инфекции у пациента с подавленной иммунной системой может вызывать энцефалиты, пневмонии и миокардиты, часто с летальным исходом.

Последствиями инфицирования женщины бывают выкидыши и мертворождение, если инфицирование происходит в течение первых трех месяцев беременности, и - необратимые неврологические повреждения новорожденного в случае инфицирования во втором и третьем триместре беременности.

При первичном инфицировании токсоплазмой gondii иммунная система начинает вырабатывать антитела класса М. Существующие на сегодняшний день методы позволяют обнаружить их только через 14 дней после заражения [55]. В последующие несколько месяцев уровень IgM снижается и присутствует в организме не более 1 года [56, 57]. Антитела этого класса не образуются при реактивации инфекции. Поэтому качественное определение IgM к токсоплазме дает быстрое подтверждение острой или недавней инфекции [58-61]. Так как антитела класса М не проникают через плаценту, они используются как маркеры эмбриональной инфекции в течение беременности [53, 54, 62-65]. Более того, проверка на наличие антител класса IgM у новорожденного одновременно с проверкой материнских IgM позволяет осуществлять раннюю диагностику врожденного токсоплазмоза.

Поскольку тяжесть последствий заражения токсоплазмозом зависит от срока беременности, установление конкретного времени заражения является существенным. Для конкретизации момента заражения беременной во всем мире широко используется сопоставление результатов обнаружения IgM с титром и авидностью IgG [66-72].

В отличие от класса IgM уровень антител класса G возрастает в течение 14 дней после первого определения IgM и остается постоянным неограниченное количество времени [55, 73]. IgG антитела к токсоплазме могут присутствовать в организме в течение всей жизни. Следовательно, постоянный титр IgG антител указывает на более раннее инфицирование, в то время как четырехкратное и более увеличение титра является признаком активной инфекции. Так как антитела класса G проникают через плаценту, последовательное многократное определение уровня IgG антител у младенца поможет отличить врожденное заражение (постоянный уровень) от неонатального (рост титра).

Обнаружение антител класса M к токсоплазме следует проводить с помощью ИФА БПТ ИммуноКомб TOXO IGM согласно инструкции, прилагаемой к набору. Общую схему постановки анализа см. гл. 4.1, таблица 3, рисунок 3.

Результаты анализа проявляются в виде серо-голубых точек на поверхности зубца гребня. Качественная оценка результата осуществляется визуально, сравнением интенсивности окрашивания нижнего пятна каждого образца с интенсивностью окрашивания на зубце с положительным контролем, или автоматически на приборе КомбСкан III™ (см. 4.1.6.).

5.1.1. Чувствительность и специфичность теста ИммуноКомб TOXO IGM

Чувствительность и специфичность теста ИммуноКомб TOXO IGM была изучена на панели из 480 образцов сывороток в сравнении с ИФА референс-тестом. Сомнительные результаты были проверены методом непрямой иммунофлуоресценции и реакцией агглютинации. Результаты суммированы в таблице 5.

Таблица 5. Результаты исследования

* Включает один образец положительный в ИФА, но отрицательный в обоих других тестах.

Исходя из этих результатов, были вычислены следующие показатели теста:

• Чувствительность 97,7%,
• Специфичность 100,0%.

5.2. Количественная диагностика IgG к токсоплазме в сыворотке, плазме или цельной крови

Количественное определение антител класса G к токсоплазме следует проводить с помощью ИФА БПТ ИммуноКомб TOXO IGG согласно инструкции, прилагаемой к набору. Общую схему постановки анализа см. гл. 4.1, таблица 3, рисунок 3.

Результаты анализа проявляются в виде серо-голубых точек на поверхности зубца гребня. Количественную оценку результатов осуществляют визуально с помощью шкалы CombScale или автоматически на приборе КомбСкан III ^тм (см. 4.1.6.). Результат с концентрацией антител G большей либо равной 10 МЕ/ мл (IU/ml) признается положительным.

5.2.1. Чувствительность и специфичность теста ИммуноКомб TOXO IGG

Чувствительность и специфичность теста ИммуноКомб TOXO IGG была изучена н<а примере 489 образцов сывороток в сравнении с ИФА референс - тестом и иммунофлуоресцентным анализом. Результаты суммированы в таблице 6.

Таблица 6. Результаты исследования

Исходя из этих результатов, были вычислены следующие показатели теста:

• Чувствительность 97,5%,
• Специфичность 97,2%.