Международная научно-практическая конференция Дети и ВИЧ-инфекция. Сборник материалов конференции, СПб, 2011, стр.234-235
СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ БЕСПРИБОРНЫХ ТЕСТОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИЧ
Дробченко А.Е., проф. Ривец Б., проф. Сэмюэльс Ф.
ЗАО «Биоград», Санкт-Петербург, Orgenics LTD, Израиль, Orgenics PBS., Франция
В 2007-2010 годах в рамках Приоритетного национального проекта в сфере здравоохранения для экспресс скрининга на наличие антител к ВИЧ, в том числе и у беременных, в медицинские учреждения России поставлялись следующие бесприборные тесты: иммуноферментные (ИФА) ImmunoComb II HIV1+2 BiSpot, производства Orgenics, Израиль (ИммуноКомб), иммунохроматографические (ИХА) Retrocheck HIV, производства Qualpro Diagnostics, Индия (Ретрочек), ИХА Determine HIV-1/2, производства Abbott Laboratories, США (Детермин), ИХА-ВИЧ 1/2-ФАКТОР, производства Фактор-Мед, Россия (Фактор).
С целью выбора наиболее оптимальных бесприборных тестов для обследования беременных на наличие антител к ВИЧ проанализированы результаты Российских государственных сравнительных испытаний тестов для экспресс-диагностики ВИЧ и данные ВОЗ по аналогичным тест-системам. Исходя из приведенных данных по чувствительности, специфичности тестов и распространённости ВИЧ в России, рассчитана прогностическая ценность положительного результата (PPV) теста.
Материалы и методы. Тесты Ретрочек, Детермин, Фактор основаны на принципе иммунохроматографии. ИХА-тесты выполнены в виде тест-полоски или тест-кассеты. Для проведения анализа на тест-систему вносится 1-2 капли (25-50 мкл) сыворотки в область образца, туда же добавляется 1 капля буфера и через 10-20 минут получается результат.
Отличительной особенностью тестов ИммуноКомб является проведение полноценного иммуноферментного анализа без использования оборудования за меньшее время (36 минут) и с возможностью индивидуального анализа. Тесты ИммуноКомб выполнены в оригинальном формате ИммуноГребней, являющихся твердой фазой, на поверхность которых нанесены антигены. Все необходимые реагенты помещены производителем в лунки планшеты - Проявочной Ванны. Для проведения анализа сыворотка или плазма крови (50 мкл) вносится в ячейки первого ряда Проявочной Ванны. Анализ проводится переносом Гребня из одного ряда Проявочной Ванны в другой с инкубацией на каждом шаге. Результаты анализа проявляются через 36 минут в виде окрашенных точек на зубце. Появление только верхней точки (внутренний контроль) указывает на то, что исследуемый образец не содержит антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Появление на зубце вместе с верхней средней точки указывает на присутствие в образце антител к ВИЧ‑2. Круглая окрашенная нижняя точка указывает на присутствие в образце антител к ВИЧ‑1.
Результаты и обсуждение. Российские государственные испытания (Отчет Департамента госсанэпиднадзора МЗРФ от 22.03.04, таблица 24) показали, что тест ИммуноКомб выявляет антитела к ВИЧ во всех образцах сероконверсионной панели BBI HIV9017, начиная с 6-го, Детермин - с 10-го образца, Ретрочек - с 9-го образца, тесты Фактор в испытаниях не участвовали.
По данным производителя сероконверсионной панели BioClinical Partners, США, планшетные ИФА тест-системы AxSYMAnti-HIV1/2 и Architect HIVAg/Ab Combo, производства Abbot, США и Enzymum-Test HIV Combi, производства Roche, Швейцария выявляют антитела к ВИЧ с 7 -го образца данной панели, Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ab производства Organon, Нидерланды - с 9-го образца (MA, 02038, USA Seroconversion Panel Catalog no. HIV 9017). В соответствии с данными о дате забора образцов данной панели тесты ИммуноКомб выявляют антитела к ВИЧ на 11-15 дней раньше, чем ИХА-тесты, и на 4 -11 дней опережают ИФА планшетные тест-системы известных зарубежных производителей.
По результатам испытаний ВОЗ (HIV Assays, Report 16 ; WHO, 2009, Annex 2, p.38): ИммуноКомб выявляет антитела к ВИЧ-1 на 8,5 дней раньше референс-теста Enzygnost Anti-HIV 1/2 Plus; тесты Детермин и Ретрочек выявляли антитела позже референс-теста. Чувствительность тестов ИммуноКомб, Детермин, Ретрочек составляет 100%. Специфичность тестов ИммуноКомб составляет 99,7%, тестов Детермин - 99,4%, тестов Ретрочек - 99,1%. Доля ложноположительных результатов для этих тестов составляла 0,3%, 0,6% и 0,9% соответственно. Данные по испытаниям ВОЗ тест-систем Фактор отсутствуют. В отчете ВОЗ для значений распространенности ВИЧ 6,00% рассчитана предсказательная ценность положительного результата (PPV), которая для тестов ИммуноКомб составляет 95,51%, для тестов Детермин - 91,41%, для тестов Ретрочек - 87,64%. Мы рассчитали по формуле, указанной в отчете ВОЗ, PPV для среднего по России уровня распространенности ВИЧ 0,30%. PPV тестов ИммуноКомб составило 50%, PPV тестов Детермин - 33%, PPV тестов Ретрочек - 25%. Это означает что количество подтверждающих тестов, необходимых при работе с тест-системами ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпот будет в полтора раза меньше, чем при работе с тест-системами Детермин ВИЧ 1/2 и в два раза меньше, чем при работе с тестами Ретрочек ВИЧ.
Выводы. Применение бесприборных иммуноферментных тестов ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпот для выявления ВИЧ-инфекции обеспечивает сокращение периода окна, минимизацию ложноположительных результатов, которые особенно нежелательны при назначении химиопрофилактики при родах и в период новорожденности.