Сборник материалов V II Регионального научного форума "Мать и Дитя 2014", Москва 2014, стр. 324-326.
ЭКСПРЕСС - ТЕСТЫ ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ РЕСПИРАТОРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Дробченко А.Е.*, д.м.н. Рищук С.В.**
ЗАО «Биоград»*, ГБОУ ВПО Северо-Западный государственный медицинский университет
им. И.И. Мечникова **, Санкт-Петербург. тел.: 812-3252170, E-mail: biograd@biograd.ru
Одна из причин смертности у младенцев и маленьких детей острые респираторные инфекции. Большинство респираторных заболеваний: Грипп, РСВ, Стрептококк А, Пневмококк, Легионеллез имеют одинаковые клинические проявления и требуют отличающуюся химиотерапию, зависимую от возбудителя заболевания. Обычные методы диагностики включают 24-48 часовое культивирование образцов, длительное ожидание результата тестирования не позволяет во время начать лечение. Первоначально назначаемое лечение большинства пациентов с ОРИ сегодня является эмпирическим. Для своевременного назначения адекватной конкретному заболеванию терапии важно быстро идентифицировать возбудитель.
Цель: Для предотвращения внутрибольничного заражения беременных и борьбы с антибиотикорезистентностью необходимо внедрение в практическое здравоохранение быстрых методов для дифференциации респираторных заболеваний. Исследованы экспресс-тесты BinaxNOW, производства Binax Inc., США для дифференциальной диагностики ОРИ. Тесты BinaxNOW, зарегистрированы Росздравнадзором, разрешены к применению FDA, соответствуют стандартам директив ЕС и широко используются в Европе и США.
Методы: Тесты Бинакс для экспресс-диагностики гриппа А и В, РС-вируса, стрептококка А, пневмококка, легионеллёза были исследованы в рамках мультицентровых испытаний. Каждый тест был испытан на 1000-5000 образцов. Тесты Binax NOW представляют собой иммунохроматографический анализ, выполненный в удобном формате в виде закрывающейся книги. Такой формат позволяет использовать тампоны с образцами мазков без предварительного элюирования в специальных пробирках. Антитела к выявляемому антигену и контрольные антитела иммобилизованы на мембране в виде отдельных линий и вместе с другими реагентами и подушечками, установлены внутри закрывающейся Тест-Кассеты в виде книги. При проведении анализа, после внесения образцов, с клейкой области Тест-Кассеты снимается пленка и Тест-Кассета закрывается и заклеивается, что позволяет предотвратить дальнейший контакт с потенциально инфицированным материалом. Плотное закрытие Тест-Кассеты помогает специальным впитывающим подушечкам очистить мембрану, тем самым обеспечивает высокую специфичность теста. Через 5-15 минут результаты определяются по наличию или отсутствию линий в зоне образца, защищенной прозрачной пластиковой вставкой. В тестах предусмотрена отдельная линия для внутреннего контроля, подтверждающая, что реагенты не были повреждены при хранении и тест выполнен правильно.
Результаты и обсуждение: На результаты тестов Бинакс не влияла предшествующая антибиотикотерапия. Испытания показали высокую чувствительность/специфичность тестов BinaxNOW. Данные показатели быстрого теста BinaxNOW® Streptococcus pneumoniae для выявления антигена Streptococcus pneumoniae в моче составили 86%/94%, в спинномозговой жидкости у пациентов с менингитом - 97%/99%. Streptococcus pneumoniae считается основной причиной пневмонии неизвестной этиологии (30-50% внутрибольничной бактериальной пневмонии), при которой задержка антибиотикотерапии связана с увеличением риска смерти, поэтому для своевременного выявления возбудителя необходимо использование быстрых тестов. Антиген Legionella pneumophila серогруппы 1 в образцах мочи от пациентов с симптомами пневмонии выявляется тестом BinaxNOW Legionella с чувствительностью/специфичностью 95%/95% соответственно. Антиген Legionella pneumophila серогруппы 1 выявляется в моче приблизительно через 3 суток после появления симптомов болезни. Быстрые тесты BinaxNOW, дающий результат в течение 15 минут как ранних, так и поздних стадий болезни позволяют врачу начать лечение немедленно, выписав наиболее подходящий препарат: дешевле, более эффективно и лучше для лечения пациента с пневмококком пенициллино-резистентные штаммы, макролиды для легионеллезной пневмонии. ИХА тест BinaxNOW Strep A выявляет антиген Streptococcus pyogenes группы А по мазкам из горла за 5 минут с чувствительность/специфичность 92%/100%. Аналитическая чувствительность 1.8x105 КОЕ/тест ATCC 19615, 1.0x105КОЕ/тест (мукоидный штамм). Использование данного теста сокращает вероятность дальнейших осложнений, уменьшает распространение инфекции. Чувствительность/специфичность теста BinaxNOW RSV, используемого для определения антигена РС-вируса в образцах назального смыва - 89%/100%, в носоглоточных мазках 93%/93%. Испытания показали, что тест BinaxNOW Influenza A & B выявляет нуклеопротеиновые антигены и дифференцирует грипп А и В в образцах носоглоточного и назального мазков, назального смыва/аспирата при этом обнаруживает различные штаммы гриппа, включая H5N1, H1N1 и сезонные штаммы. Легко забираемые образцы позволяют использовать тесты в различных условиях, один образец можно использовать сразу в двух тестах: BinaxNOW RSV & BinaxNOW Influenza, что позволяет точнее определить тех, кому нужны противовирусные препараты и начать раннее лечение лиц с высокой степенью риска для того, чтобы уменьшить осложнения. Быстрая диагностика таким образом обеспечивает избежание усиления резистентности к противовирусным препаратам и избежание ненужных побочных эффектов.
Выводы: Первоначально назначаемое лечение большинства пациентов с ОРИ является эмпирическим, внедрение в практику быстрых тестов BinaxNOW позволяет врачу своевременно выписать наиболее подходящие антибиотики или противовирусные препараты. Выявление этиологического агента в течение 5-15 минут при первичном осмотре позволяет сузить спектр назначаемых препаратов и, таким образом, снизить потребление антимикробных и противовирусных препаратов.
Быстрый результат, высокая чувствительность и специфичность, удобный формат тестов BinaxNOW позволяют провести раннюю достоверную дифференциацию респираторных заболеваний, незамедлительно принять решение о лечении и противоэпидемических мерах в родильных стационарах, предотвращающих занос и нозокомиальное распространение инфекции.
Экспресс-тесты BinaxNOW дифференцируют грипп А и В, Стрептококк группы А, РС-вирус, пневмококковую и легионеллёзную инфекцию, предотвращают излишнее назначение антибиотиков и помогают в борьбе с резистентностью к антибиотикам. Сократить пребывание в больниц