Вирус краснухи принадлежит к семейству вирусов Togavirudae и обнаруживается в основном в человеческих популяциях. Передается в основном воздушно-капельным путем, при непосредственном контакте. Инкубационный период составляет 1-2 недели, заболевший человек заразен за 7 дней до появления сыпи и до 7-10 дня после исчезновения высыпания. Наибольшая частота заболеваний отмечается в возрастной группе от 5 до 14 лет. У детей до 90% случаев заболевания протекают без видимых симптомов. Инфицирование у большей части проявляется в виде мягкого, само собой проходящего заболевания, характеризующегося макуло-папулезной сыпью, небольшим повышением температуры и лимфоденопатией. Иногда бывают мягкие скоротечные артралгии и артриты.

В отличие от вышесказанного, первичное заражение на ранних стадиях беременности может нанести серьезные повреждения плоду, явиться причиной мертворожденного или выкидыша. Эпидемия 1960-1964 гг., когда в США краснухой заболело 50 тыс. беременных женщин, привела к рождению 20 тыс. детей с синдромом врожденной краснухи (СВК), к 10 тыс. выкидышей и мертворожденных. Сегодня, в мире регистрируется 300 тыс. детей с СВК [74, 75].

По научным оценкам, в России каждая пятая женщина (в Москве – каждая третья) не обладает достаточным иммунитетом против краснухи. Ежегодно в России регистрируется от 150 до 500 тыс. больных краснухой, при этом, 20-25% случаев приходится на лиц старше 15 лет [76-78]. При такой заболеваемости ожидаемое число родившихся детей с СВК должно превышать 500-700 случаев в год. К сожалению, точность учета СВК в России до сих пор низкая. Согласно специальным исследованиям, на долю СВК приходится 27-35% внутриутробной патологии [79], с учетом отсутствия рутинной диагностики и того, что до 90% всех случаев инфекции у взрослых протекает бессимптомно, этот показатель может быть выше [75, 76-79].

Синдром врожденной краснухи может включать серьезные врожденные аномалии органов зрения (катаракта, глаукома, ретинопатия, хориоретинит, микрофтальм), пороки сердечно-сосудистной системы (незаращение боталлова протока, стеноз устья легочной артерии, дефекты межжелудочковой и межпредсердной перегородок, миокардит), пороки органов слуха, гепатоспленомегалию, пневмонию, поражения центральной нервной системы (микроцефалия, энцефалит, гидроцефалия, умственная отсталость), пищеварительной и мочеполовой систем, поражения длинных трубчатых костей. К другим проявлениям относятся тромбоцитопения, анемия, гипотрофия, отставание в физическом развитии. Задержку роста и сахарный диабет также связывают с поздними осложнениями внутриутробной краснухи. Потенциальная опасность внутриутробного инфицирования плода происходит в 100% случаев в первые 12 недель беременности. При заражении в первые 8 недель беременности у 40% инфицированных наблюдаются спонтанные аборты и мертворождение [80-83]. Если инфицирование произошло на 13 - 16 неделе беременности, то у 15% родившихся детей выявляется глухота и ретинопатия. На более поздних периодах беременности (17 - 20 недель) инфицирование плода наблюдается редко, в отдельных случаях.

В широкой практике диагноз краснухи ставят на основании клинических симптомов, эпидемиологических данных и результатов лабораторной диагностики. В типичных случаях клинический диагноз поставить нетрудно. Но за последние годы краснуха в ряде случаев приобрела иное течение - изменился инкубационный период, выраженность симптомов интоксикации, характер сыпи, возраст заболевших. Сложен клинический диагноз при стертой форме краснухи. Затруднена, а иногда просто не решаема, особенно в случае стертых форм, дифференциальная диагностика краснухи и кори. В этом случае диагноз краснуха или корь ставят с помощью эпидемиологических данных и, прежде всего, с учетом сведений о контакте. Однако в настоящий момент в условиях начавшегося снижения заболеваемости краснухой, стертости клиники краснухи и кори, эпидемиологический метод постепенно начинает утрачивать свое первостепенное диагностическое значение.

Для лабораторной диагностики краснухи, особенно краснухи у беременных и диагностики СВК, с целью воспроизводимости и стандартности результатов при динамическом наблюдении, наиболее целесообразно использовать непрямой иммуноферментный анализ, основанный на обнаружении видоспецифических антител [84-88].

Иммунный ответ при врожденной краснухе имеет ряд характерных закономерностей. При острой инфекции специфические IgM антитела появляются в то время, когда исчезает сыпь и, обычно, присутствуют не более 4-5 недель. При повторном инфицировании IgM антитела не образуются. Поэтому обнаружение IgM антител к краснухе позволяет установить первичное заражение. Если мать переболела краснухой в период беременности, но плод не был инфицирован, то материнские IgG антитела передаются плоду уже с 12-16 недели, тогда как материнские IgM антитела обычно через плаценту не проходят. Пассивные IgG антитела исчезают у ребенка в течение 6-10 месяцев после рождения. В тех случаях, когда произошло внутриутробное инфицирование, у зараженного плода, наряду с появлением материнских IgG антител, на 16-24 неделях развития начинают вырабатываться собственные вирусспецифические IgM антитела, которые могут персистировать у ребенка с врожденной краснухой в течение длительного времени после рождения - до 6 месяцев, а в отдельных случаях до года и дольше. Обнаружение специфических IgM антител у новорожденных позволяет диагностировать внутриутробное инфицирование вирусом краснухи. Со второй половины первого года жизни у детей с врожденной краснухой начинают продуцироваться специфические IgG антитела.

У взрослых IgG антитела к вирусу появляются в то время, когда исчезает сыпь и, обычно, сохраняются всю жизнь. Поэтому постоянный титр IgG антител указывает на заболевание, перенесенное в прошлом, в то время как четырехкратное или большее увеличение титра является признаком недавнего заражения. Тем не менее, повышенный титр IgG в отсутствии клинических симптомов может также предполагать и повторное инфицирование. Эту возможность следует исключить, получив отрицательный результат подтверждающего IgM теста.

Образование циркулирующих IgG антител у внутриутробно инфицированного ребенка обычно продолжается до 3-4 лет после рождения. Поэтому последовательный контроль уровня антител IgG класса у младенца поможет отличить внутриутробную краснуху (постоянный уровень, плато) от послеродовой краснухи (увеличение титра).

Так как измерение уровня IgG к вирусу краснухи является первостепенным в постановке правильного диагноза, основным требованием, предъявляемым к тест-системам, предназначенным для этих целей, является определение титра противокраснушных антител класса IgG в сыворотках пациентов в международных единицах (МЕ). Количественная оценка титра IgG также необходима в случаях изучения популяционного иммунитета или оценки эффективности вакцинопрофилактики краснушной инфекции. Сейчас уже хорошо известно, что если речь идет о защите от краснухи, то концентрация противокраснушных антител в сыворотке должна быть не менее 15 МЕ/мл. Только в этом случае человек (особенно женщина фертильного возраста) будет защищен. С помощью иммуноферментного анализа во всем мире строится стратегия и тактика программ вакцинации, программ снижения СВК к 2010 г., контроль иммуногенности и эффективности профилактических противокраснушных препаратов и оценка популяционного иммунитета к краснухе среди населения.

К мерам неспецифической профилактики краснухи и ее тератогенных последствий относят исключение контактов беременных с больными краснухой, своевременную и точную диагностику краснухи у заболевших беременных с подозрением на краснуху, расшифровку этиологии очагов экзантемных заболеваний, где оказались беременные, определение иммунного статуса, серологического надзора за неиммунными (восприимчивыми) лицами.

Во многих странах проводится специфическая профилактика краснухи путем вакцинации живой ослабленной вакциной. В некоторых европейских странах вакцинируют всех детей в 15 месяцев, а в других - только девочек в возрасте 8 - 14 лет. Во Франции, Исландии и Японии проводят серологическое экспресс – обследование всех девушек, при отсутствии у них краснушных антител проводится прививка.

6.1. Обнаружение IgM к вирусу краснухи в сыворотке, плазме или цельной крови

Обнаружение антител класса М к краснухе следует проводить с помощью ИФА БПТ ИммуноКомб RUBELLA IGM согласно инструкции, прилагаемой к набору. Ниже приведено краткое описание процедуры. Общую схему постановки анализа см. гл. 4.1, таблица 3, рисунок 3.

Результаты анализа проявляются в виде серо-голубых точек на поверхности зубца гребня. Качественная оценка результата осуществляется визуально, сравнением интенсивности окрашивания нижнего пятна каждого образца с интенсивностью окрашивания на зубце с положительным контролем, или автоматически на приборе КомбСкан III™ (см. 4.1.6.).

6.1.1. Чувствительность и специфичность теста Иммунокомб RUBELLA IGM

Чувствительность и специфичность теста Иммунокомб RUBELLA IGM изучались на 360 образцах в сравнении с ИФА референс-методом (ELISA). Результаты представлены в таблице 7.

Таблица 7. Результаты исследования

Исходя из этих результатов, были вычислены следующие показатели теста:

• Чувствительность - 91.9%
• Специфичность - 100%

6.2. Количественное определению IgG к вирусу краснухи в сыворотке, плазме или цельной крови

Количественное определение антител класса G к краснухе следует проводить с помощью ИФА БПТ ИммуноКомб RUBELLA IGG согласно инструкции, прилагаемой к набору. Ниже приведено краткое описание процедуры. Общую схему постановки анализа см. гл. 4.1, таблица 3, рисунок 3.

Результаты анализа проявляются в виде серо-голубых точек на поверхности зубца гребня. Количественную оценку результатов осуществляют визуально с помощью шкалы CombScale или автоматически на приборе КомбСкан III™ (см. 4.1.6.). Результат с концентрацией антител G большей либо равной 15 МЕ/ мл (IU/ml) признается положительным.

6.2.1. Чувствительность и специфичность теста ИммуноКомб RUBELLA IGG

Чувствительность и специфичность теста ИммуноКомб RUBELLA IGG была изучена на примере 223 образцов сывороток в сравнении с ИФА референс - тестом. Результаты суммированы в таблице 8.

Таблица 8. Результаты исследования

Исходя из этих результатов, были вычислены следующие показатели теста:

• Чувствительность 100%
• Специфичность 100%.