Глава 1. Принцип анализа

В наборе ИммуноКомб используется метод твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Поскольку  тест-система ИммуноКомб, типовой набор реагентов, анализ проводится по единому плану, Методика анализа применительно к конкретной специфичности приводится в Наставлении, прилагаемом к каждому набору ИммуноКомб.

Рис. 1. Гребень ИммуноКомб.

Твердая фаза - это гребенка  с 12 зубцами (Рис. 1). Каждый зубец сенсибилизирован известными специфическими биореагентами - антигенами (АГ) или антителами (АТ) в двух или трех точках:

• верхняя точка - козьими или кроличьими АТ к человеческому IG (внутренний контроль),
• средняя и/или нижняя точка - специфическими реагентами - АГ или АТ.

Рис. 2. Проявочная ванна.

Проявочная ванна (Рис. 2) Имеет 6 рядов (A - F) c 12 лунками в каждом ряду. В лунках каждого ряда содержатся  растворы веществ, готовые к употреблению на различных  этапах проведения исследования. Анализ проводят шаг за шагом, перемещая гребенку из одного ряда в другой и инкубируя ее на каждом этапе (Рис. 3). В начале анализа образцы искомой сыворотки или плазмы помещают в раствор для разведения в лунках ряда А проявочной ванны. Затем в лунки ряда А опускают гребенку. Искомые АТ или АГ, если они есть в исследуемой сыворотке (плазме), избирательно свяжутся с соответствующими специфическими известными реагентами, фиксированными в средней и/или нижней точке зубца. Одновременно пойдет реакция - образование иммунного комплекса в верхней точке зубца (внутренний контроль). Несвязавшиеся (неспецифические) компоненты смываются в лунках ряда В. Специфически связавшиеся компоненты далее в лунках ряда С будут реагировать с компонентами, мечеными ферментом щелочной фосфатазой. В следующих рядах ячеек несвязавшиеся компоненты удаляют промывкой. В лунках ряда F связанная (на зубце) щелочная фосфатаза взаимодействует с хромогенными компонентами. Результаты реакции наблюдаются в виде серо-голубых пятен на поверхности зубца гребенки.

Рис. 3. Достоверность результатов.

В набор входит "положительный контроль" и "отрицательный контроль", которые должны использоваться при анализе каждой группы исследуемых сывороток (плазмы). На зубце с положительным контролем должны быть два (или три) пятна: верхнее - внутренний контроль, среднее и/или нижнее - специфический положительный контроль (Рис.4). На зубце с отрицательным контролем появитсятолько верхнее пятно (внутренний положительный контроль), а среднего и/или нижнего пятна вовсе не должно быть либо оно будет очень слабым (еле заметным). Верхнее пятно также должно появиться на всех остальных (опытных) зубцах, тем самым подтверждая, что набор работает правильно.