Дробченко С.Н., Марголин О, Ривец Б Первый экспресс-тест для одновременного дифференцированного определения антигена и антител к ВИЧ в России. Высокие медицинские технологии XXI века. Материалы седьмой международной конференции.- Бенидорм, Испания, 2008.
ПЕРВЫЙ ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ ОДНОВРЕМЕННОГО ДИФФЕРЕНЦИРОВАННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНА И АНТИТЕЛ К ВИЧ В РОССИИ
Дробченко С.Н., Марголин О., Ривец Б
ЗАО «Биоград» (www.biograd.ru), Санкт-Петербург, Россия; Орженикс Лтд., Явне, Израиль; Орженикс С.А., Курбевуа, Франция
Введение: Современные ИФА тесты для одновременного определения антигена и антител к ВИЧ дают единый ответ о наличии ВИЧ-инфекции, не дифференцируя результаты по антигену и антителам. Отличительным свойством разработанной фирмой Орженикс тест-системы ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат является дифференцированное определение антигена ВИЧ p24, антител к ВИЧ-1 и антител к ВИЧ-2. Это позволяет определить статус каждого из маркеров, что особенно важно в период «окна». В данной работе проанализированы результаты сравнительных испытаний тест-систем ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот, полученные в различных клинических условиях во Франции, Израиле, Бельгии и России.
Методы: В тест-системе ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат применен прямой твердофазный ИФА. Твердой фазой является пластиковый гребень, на поверхность зубцов которого в разных местах нанесены: моноклональные антитела к антигену ВИЧ p24, антиген ВИЧ-1 gp41, антиген ВИЧ-2 gp36 и биотинилированный БСА(внутренний контроль). Результат, получаемый в виде серо-голубых точек на зубцах гребня, оценивался визуально или на приборе КомбСкан. В качестве референс-тестов использовались BioRad Genscreen Plus HIV Ag-Ab, Abbott HIV Ag/Ab Combo и Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ab.
Всего было исследовано 3297 образцов сыворотки и плазмы, включая 878 образцов положительных во ВИЧ-1 (включая группу О), 224 образца, положительных по ВИЧ-2 и 2195 отрицательных образцов. Среди отрицательных образцов было 462 образца от пациентов с различными инфекционными (гепатитом A, B, C, HTLV, CMV, HSV, EBV, малярией и вакцинированные против вируса гриппа) и неинфекционными заболеваниями и 190 образцов групп высокого риска.
Результаты: Тест-система ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат выявила все положительные образцы, что соответствует чувствительности 100% по всем трем маркерам. Специфичность составила: антитела к ВИЧ-1 - 99.5%, антитела к ВИЧ-2 - 100%, антиген p24 — 99.8%. При исследовании сероконверсионных панелей ИммуноКомб ТриСпот определял ВИЧ в среднем на 7 дней раньше, чем антительные тесты на ВИЧ 3-го поколения. Чувствительность по антигену ВИЧ p24 при исследовании образцов с ранних стадий первичной ВИЧ инфекции составила 5 пг/мл, включая группу О. При исследовании образцов с известным количеством антигена ВИЧ p24, была продемонстрирована способность определения до 1.5 пг/мл.
Заключение: Одновременное определение антигена и антител к ВИЧ с помощью тест-системы ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат уменьшает не определяемый период сероконверсии на 2-13 дней по сравнению с тестами 3 поколения и определяет ВИЧ на более ранних стадиях.
Дифференцированное определение антигена и антител позволяет оценивать кинетику каждого из параметров во время сероконверсионного периода «окна», что позволяет определять пре-, пер- и сероконверсионную стадию инфекции. Это особенно важно в таких случаях как передача ВИЧ от матери к ребенку.
THE FIRST EXPRESS TEST FOR SIMULTANEOUS DIFFERENTIAL DETECTION OF ANTIGEN AND ANTIBODIES TO HIV IN RUSSIA.
Drobchenko S.N., Margolin O., Rivetz B.
JV Biograd (www.biograd.ru), St. Petersburg, Russia; Orgenics Ltd., Yavne, Israel; Orgenics S.A., Courbevoie, France.
Introduction: Modern ELISA tests for simultaneous detection of antigen and antibodies to HIV give a unified answer, without differentiating the results for antigen and antibodies. The distinctive property of the ImmunoComb II HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab is differential detection of HIV p24 antigen, HIV-1 antibodies and HIV-2 antibodies. It allows to determine the status of every marker, which is especially important during the “window” period. This work analyses the results of trials of ImmunoComb II HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab test systems in France, Israel, Belgium and Russia.
Methods: The ImmunoComb II HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab utilises direct ELISA. The Solid Phase is a plastic comb, the surface of which is covered in different places with: monoclonal antibodies to HIV p24 antigen, HIV-1 gp41 antigen, HIV-2 gp36 antigen and biotinylated BSA (internal control). The results, obtained as gray-blue spots on the teeth of the comb, are interpreted visually or using CombScan scanner. The reference tests were: BioRad Genscreen Plus HIV Ag-Ab, Abbott HIV Ag/Ab Combo и Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ab. In total 3297 samples were tested including 878 HIV-1 samples (incl. group O), 224 HIV-2 samples and 2195 negative samples. Among the negative samples there were 462 samples from patients positive for different infectious diseases (hepatitis A, B, C, HTLV, CMV, HSV, EBV, malaria and vaccinated against influenza) and non-infectious diseases and 190 samples from high-risk groups.
Results: The ImmunoComb II HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab has detected all the positive samples, which corresponds to 100% sensitivity for all the three markers. The specificity was 99.5% for HIV-1 Ab, 100% for HIV-2 Ab and 99.8% for HIV p24 Ag. When testing the seroconversion panels ImmunoComb II HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab detected HIV 7 days earlier on average than 3-rd generation antibody tests. While studying samples with known quantity of HIV p24 antigen, the sensitivity demonstrated was up to 1.5 pg/ml.
Conclusions: Simultaneous detection of antigen and antibodies to HIV using the ImmunoComb II HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab test-system shortens the underterminable seroconversion period by 2 to 13 days as compared to 3-rd generation tests and allows to detect HIV at earlier stages. Differential detection of antigen and antibodies allows to study the kinetics of each parameter during the seroconversion “window” period, which allows to detect pre, per and seroconversion stages of infection. This is especially important in such cases as mother to childer.